纯氟油Fluo-Oil 135(氟（fú）油3M Novec HFE7500电子氟（fú）化液的替代品)

Fluo-Oil 135（简（jiǎn）称FO135） 是一种纯氟化油，可（kě）用于替换氟油3M Novec HFE7500电（diàn）子（zǐ）氟化（huà）液（yè）。 Fluo-Oil 135氟油的（de）化学和物理（lǐ）化学性质（zhì）与3M Novec HFE7500 相似，如下（xià）表所示（shì）:

优（yōu）势

生物相容性、可重复性和稳定性。

如何使用？

氟油Fluo-Oil 135用于稀释FluoSurf Neat表面活（huó）性剂或已经用（yòng）Fluo-Oil 135油稀释的表面活（huó）性剂。

（由于FluoSurf Neat表面（miàn）活性（xìng）剂是一种PFPE-PEG结构的（de）复杂高效纯表面活性（xìng）剂，因（yīn）为类似于PFPE-PEG结（jié）构的纯表面活（huó）性剂如FluoSurf Neat，Surf-Drop，PFPE-PEG-PFPE两嵌段（duàn）或三嵌段表面活性剂，Surf 含氟表面活性剂等（děng），基本上都可以（yǐ）使（shǐ）用（yòng）纯（chún）氟油（yóu）Fluo-Oil 135进行（háng）稀释。稀释的浓度（dù）从0.2%到12%之（zhī）间。）

保（bǎo）存

室温下避光（guāng）保存

安全注意事项

● 避免吸入、摄入和（hé）接触皮肤（fū）和（hé）眼睛

● 穿（chuān）戴耐化学腐蚀的个人防护装备

● 戴上合（hé）适的手套

● 穿（chuān）合适的（de）防护服

● 戴侧护罩的安全眼（yǎn）镜

与3M HFE7500油（yóu）产生液（yè）滴性能的（de）测试比较

分（fèn）别（bié）用3M HFE7500和Fluo-Oil 135氟（fú）化（huà）油（yóu）稀释FluoSurf neat表面活性剂，得到4w/w%的质（zhì）量浓度。

水（shuǐ）滴产生或油包（bāo）水液（yè）滴产生（shēng）的两相流速：

油相流速为300μL/hr，水相流（liú）速为100μL/hr。

水相为PBS溶液或100μM荧光素（sù）的PBS溶液（用于测试液滴的泄露）

倒置显微镜观察和（hé）Image J软件分（fèn）析（xī）。

一（yī）、液滴尺寸及（jí）其分布（bù）

在Fluo-Oil 135和（hé）HFE7500油中，产生相（xiàng）似尺寸（cùn）的水（shuǐ）滴。在既定流（liú）速参数下，液滴（dī）的平均（jun1）直径为110μm。液滴尺寸的CV分别为2.3%（Fluo-Oil 135油）和2.9%（HFE7500油）。

二（èr）、液滴稳定性

大多数研（yán）究团队使用液滴微流体进（jìn）行细胞封装或 PCR 应用（yòng）。 因此，需要通过 PCR 的加热循环以及在 37°C 下（xià）长期孵育来产生稳定的液滴。 表面活性剂的选（xuǎn）择（zé）至关重要，但选（xuǎn）择油同样重要（yào），以确（què）保可重复的实验以及（jí）单分散液滴（dī）群的生成和保存。

分（fèn）别从三（sān）个方面测（cè）试液滴的稳定性：一是把液滴重（chóng）新注入到玻璃观察腔室内；二（èr）是经典的PCR热循环过（guò）程，循环过（guò）程30次（cì），每次（cì）热循环为98°C运行10s, 50°C运行（háng）5s, 72°C运行10s；三是（shì）置于37℃的培（péi）养箱内放置3天。对1万个液滴进行分析。

无（wú）论是在（zài） Novec™ HFE 7500 还（hái）是（shì） Fluo-Oil™ 135 中形成（chéng） FluoSurf™ 稳（wěn）定的液滴，在 PCR 加热（rè）循环后或（huò）在（zài） 37°C 孵育 3 天后，液滴平均尺寸在生成时保持不变（biàn） [约 110μm (0.7nL)] 。此外，液滴种群仍然（rán）是单分（fèn）散的。 根（gēn）据统计分析，计算出在加热循环后，只有 5% 的（de）整体液滴的大（dà）小与平均初始液滴（dī）直径的差异超过 10%。

将氟化油（yóu）从 Novec™ HFE 7500 切换到 Fluo-Oil™ 135 对液（yè）滴稳定性没有影响（xiǎng）。

三、液滴内的分子滞（zhì）留（liú）

基于液滴的化（huà）学或（huò）生化（huà）分（fèn）析依赖于试剂在单个（gè）液滴中保持隔离。 泄漏到连续相和液滴之间的交换，即使很低，也会影响结果的（de）完整性，因此，分子保留是选（xuǎn）择氟化油时要考虑的重要参数（shù）。 众所周知，氟化油会限制（zhì）液滴之间（jiān）的分子交换，因此应验证切换油的影（yǐng）响。

同时生成两种油包水乳液[“空”（负载（zǎi） PBS）和“满”（负载荧光素）液滴]，一次使用 Novec™ HFE7500，然（rán）后使用 Fluo-Oil™ 135 作为连（lián）续（xù）相（xiàng）。 两种（zhǒng）混合物，每一种都包含两个（gè）种群，在 37°C 下孵育，并在不同（tóng）的（de）时间点拍摄照（zhào）片。 使用 ImageJ 软件对液滴内荧光强度的演变进（jìn）行了（le）统计定量分析。

上图显示（shì）了两个群体之间平均荧光（guāng）强度差异（yì）的演变（染料加载（zǎi）和（hé）空液滴）以及在初（chū）始时（shí）间点和 48 小时后相关的荧光（guāng）和明场图片。

在（zài） 24 小时的过（guò）程中，两种氟化油产生的液滴中荧光素的泄漏率相似（约 15% 泄漏），并且在（zài） Fluo-Oil™ 135 中（zhōng）产生液滴的情（qíng）况下保持恒（héng）定 3 天。相反（fǎn），在（zài） 24 小时后， Novec™ HFE7500 中液滴的泄（xiè）漏继续减少并达到 30% 左右。 这种较长孵育（yù）时（shí）间的较差保留性能可归因于后一（yī）种油的粘度（dù）略（luè）低，加速了液滴之间更（gèng）快的分（fèn）子交（jiāo）换。

结论

对于基于液滴（dī）的微流体应用，从一（yī）种氟化（huà）油类型切换到另一种（zhǒng）类型可能会（huì）对微流体（tǐ）实验（yàn）的过程产生重大影响（xiǎng），尤其是对液滴的有效（xiào）生成产生重大影响。 在氟油（yóu）3M Novec™ HFE7500电子氟化液 和 氟油Fluo-Oil™ 135 的情况下，已证实（shí）更换这两种氟化油对实验（yàn）条件和（hé）结果没有影响（xiǎng）。 当使（shǐ）用 Fluo-Oil™ 135 作为连续相时，甚至可以观察（chá）到（dào）荧光素在液滴内（nèi）的更好保留。

氟化油Fluo-Oil™ 135 是（shì）用（yòng）于液滴微（wēi）流体（tǐ）应用的3M Novec™ HFE7500 氟油（yóu） 的有效替代品。